瞬时蛋白表达及稳定细胞株开发技术
发布时间: 2023-03-06 14:55:46
转化医学平台的瞬时蛋白表达子模块运用Expi293F等悬浮细胞系瞬时转染表达质粒,通过悬浮培养2-9天左右收获发酵液获得表达产物。稳定细胞株主要是将目标抗体或其他蛋白基因转染到宿主细胞(如 CHO-S)中后,经过筛选得到高表达细胞池,然后通过有限稀释和流式分选等选定最佳的单克隆细胞系。
应用领域
单抗,重组抗原,细胞因子等表达。
技术优点
1、拥有多种可追溯来源的细胞株和多种来自不同厂商的无血清培养基。
2、瞬转可短时间内获得蛋白,并可以进行规模化制备。
3、高效率的转染方式,拥有MaxCyte电转系统和Nucleofector电转仪等。4、同步跟踪和评估稳定株高达60代的稳定性和产量。
可选仪器
MaxCyte STX 流式电穿孔转染系统 |
科耐ISF1-XC 二氧化碳摇床 |
Themo生物安全柜 |
Themo X3R离心机 |
Beckman Avanti JXN-26落地冷冻高速离心机 |
分析流程
一、瞬时蛋白表达
1、质粒的构建及提取。
2、细胞转染。
3、发酵液收获二、稳定细胞株开发。
二、稳定细胞株开发
1、质粒的构建及提取。
2、重组质粒的高效转染。
3、高表达阳性细胞池的药物筛选及单克隆化。
4、高表达株的生长表达评估。
5、细胞库建库及鉴定。
6、稳定性传代及评估。
所需时间
瞬时转染,细胞复苏及扩增培养需7天,根据具体产物转染后2-9天收获,共需时间9-16天。
稳定细胞株开发,细胞准备约7天,药物筛选约15天,克隆化约15天,产量评估约30天,稳定性评估约60天,共需约4月时间。
联系我们
刘老师:15689181260
转化医学平台的瞬时蛋白表达子模块运用Expi293F等悬浮细胞系瞬时转染表达质粒,通过悬浮培养2-9天左右收获发酵液获得表达产物。稳定细胞株主要是将目标抗体或其他蛋白基因转染到宿主细胞(如 CHO-S)中后,经过筛选得到高表达细胞池,然后通过有限稀释和流式分选等选定最佳的单克隆细胞系。
应用领域
单抗,重组抗原,细胞因子等表达。
技术优点
1、拥有多种可追溯来源的细胞株和多种来自不同厂商的无血清培养基。
2、瞬转可短时间内获得蛋白,并可以进行规模化制备。
3、高效率的转染方式,拥有MaxCyte电转系统和Nucleofector电转仪等。4、同步跟踪和评估稳定株高达60代的稳定性和产量。
可选仪器
MaxCyte STX 流式电穿孔转染系统 |
科耐ISF1-XC 二氧化碳摇床 |
Themo生物安全柜 |
Themo X3R离心机 |
Beckman Avanti JXN-26落地冷冻高速离心机 |
分析流程
一、瞬时蛋白表达
1、质粒的构建及提取。
2、细胞转染。
3、发酵液收获二、稳定细胞株开发。
二、稳定细胞株开发
1、质粒的构建及提取。
2、重组质粒的高效转染。
3、高表达阳性细胞池的药物筛选及单克隆化。
4、高表达株的生长表达评估。
5、细胞库建库及鉴定。
6、稳定性传代及评估。
所需时间
瞬时转染,细胞复苏及扩增培养需7天,根据具体产物转染后2-9天收获,共需时间9-16天。
稳定细胞株开发,细胞准备约7天,药物筛选约15天,克隆化约15天,产量评估约30天,稳定性评估约60天,共需约4月时间。
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