磷酸化修饰谱
发布时间: 2023-03-01 12:53:20
蛋白质组学技术平台可对磷酸化蛋白质组进行快速非标定量分析。
方法：在酸性条件下（pH约为2）， TiO2带正电荷，可与肽样品中具有磷酸化修饰的肽片段上的带负电荷的磷酸基团特异性结合，经清洗缓冲液清洗去除非磷酸化肽片段后，用碱性洗脱液（pH约为11），将结合于TiO2上的磷酸化肽洗脱下来，从而达到特异性富集磷酸化肽的目的。为最大限度去除肽混合物中带负电荷的酸性非磷酸化肽与TiO2非特异结合带来的干扰，需要在酸性的TiO2富集结合缓冲液中加入2,5-二羟基苯甲酸或乳酸。磷酸化肽富集完成后，通过液相色谱-串联质谱对其进行检测并进行数据分析，达到磷酸化蛋白组快速非标定量的目的。
1、不同实验条件下磷酸化蛋白质组变化及信号通路分析。
2、筛选特定蛋白激酶的磷酸化蛋白底物。
技术优点
1、独特的TiO2富集结合缓冲液配方， 可特异性富集细胞和组织中95%以上的磷酸化蛋白。
2、可在2小时完成1个样品的检测， 覆盖10000以上磷酸化修饰位点（约4000以上磷酸化蛋白）。
| Q Exactive |
|
Q Exactive HF |
|
Q Exactive HF-X |
|
Orbitrap Fusion Tribrid™ |
|
Orbitrap Fusion™ Lumos™ Tribrid™ |
| FAIMS Orbitrap Exploris 480等 |
分析流程
2、用TiO2富集磷酸肽，将TiO2富集的磷酸肽洗脱并分成3个组分，分别经液相色谱-串联质谱分析。
可选数据分析
1、磷酸化肽的鉴定及定量。
2、磷酸化肽及蛋白的GO分析及差异蛋白GO分析。
3、磷酸化肽及蛋白的Pathway通路分析及差异蛋白的Pathway通路分析。
4、重复性分析（仅针对有重复设计的项目）。
5、多样品间表达模式聚类分析（适用于样本数≥3的项目）。
| 蛋白提取物：≥2μg |
| 细胞：≥107 |
| 组织：动物组织≥30mg，植物组织：≥500mg |
| 体液：血清≥50μL，脑脊液：≥100μL |
| ★ 注：具体样品需要量根据实验方案有所不同。 |
联系我们
蛋白质组学技术平台可对磷酸化蛋白质组进行快速非标定量分析。
方法：在酸性条件下（pH约为2）， TiO2带正电荷，可与肽样品中具有磷酸化修饰的肽片段上的带负电荷的磷酸基团特异性结合，经清洗缓冲液清洗去除非磷酸化肽片段后，用碱性洗脱液（pH约为11），将结合于TiO2上的磷酸化肽洗脱下来，从而达到特异性富集磷酸化肽的目的。为最大限度去除肽混合物中带负电荷的酸性非磷酸化肽与TiO2非特异结合带来的干扰，需要在酸性的TiO2富集结合缓冲液中加入2,5-二羟基苯甲酸或乳酸。磷酸化肽富集完成后，通过液相色谱-串联质谱对其进行检测并进行数据分析，达到磷酸化蛋白组快速非标定量的目的。
1、不同实验条件下磷酸化蛋白质组变化及信号通路分析。
2、筛选特定蛋白激酶的磷酸化蛋白底物。
技术优点
1、独特的TiO2富集结合缓冲液配方， 可特异性富集细胞和组织中95%以上的磷酸化蛋白。
2、可在2小时完成1个样品的检测， 覆盖10000以上磷酸化修饰位点（约4000以上磷酸化蛋白）。
| Q Exactive |
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Q Exactive HF |
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Q Exactive HF-X |
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Orbitrap Fusion Tribrid™ |
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Orbitrap Fusion™ Lumos™ Tribrid™ |
| FAIMS Orbitrap Exploris 480等 |
分析流程
2、用TiO2富集磷酸肽，将TiO2富集的磷酸肽洗脱并分成3个组分，分别经液相色谱-串联质谱分析。
可选数据分析
1、磷酸化肽的鉴定及定量。
2、磷酸化肽及蛋白的GO分析及差异蛋白GO分析。
3、磷酸化肽及蛋白的Pathway通路分析及差异蛋白的Pathway通路分析。
4、重复性分析（仅针对有重复设计的项目）。
5、多样品间表达模式聚类分析（适用于样本数≥3的项目）。
| 蛋白提取物：≥2μg |
| 细胞：≥107 |
| 组织：动物组织≥30mg，植物组织：≥500mg |
| 体液：血清≥50μL，脑脊液：≥100μL |
| ★ 注：具体样品需要量根据实验方案有所不同。 |
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