泛素化修饰
发布时间: 2023-03-01 12:40:37
蛋白质组学技术平台可泛素化蛋白组进行快速非标定量分析。
方法：首先对泛素化蛋白组进行胰酶消化，含泛素化的赖氨酸的肽段会保留有二甘氨酸标签，利用二甘氨酸（diGG）抗体可特异性地富集肽样品中泛素化修饰肽段，通过对富集后的泛素化肽进行液相色谱-串联质谱检测和数据分析，达到泛素化蛋白组快速非标定量分析之目的。
应用领域
1、不同实验条件下泛素化蛋白质组的定量比较。
2、筛选特定E3泛素连接酶的底物。
技术优点
1、样品经胰酶消化、diGG抗体富集后，可鉴定特异性达90%的泛素化肽。
2、2小时液相色谱-质谱分析可鉴定3000个泛素化修饰位点。
可选仪器
| Q Exactive HF |
|
Q Exactive HF-X |
|
Orbitrap Fusion Tribrid™ |
|
Orbitrap Fusion™ Lumos™ Tribrid™ |
|
ultrafleXtreme MALDI TOF/TOF |
| FAIMS Orbitrap Exploris 480等 |
分析流程
可选数据分析
1、泛素化肽的鉴定及定量。
2、泛素化肽及蛋白的GO分析及差异蛋白GO分析。
3、泛素化肽及蛋白的Pathway通路分析及差异蛋白的Pathway通路分析。
4、重复性分析（仅针对有重复设计的项目）。
5、多样品间表达模式聚类分析（适用于样本数≥3的项目）。
样品要求
| 蛋白提取物：≥5μg |
| 细胞：≥107 |
| 组织：动物组织≥30mg，植物组织：≥500mg |
| 体液：血清≥20μL，脑脊液：≥30μL |
| ★ 注：具体样品需要量根据实验方案有所不同。 |
联系我们
蛋白质组学技术平台可泛素化蛋白组进行快速非标定量分析。
方法：首先对泛素化蛋白组进行胰酶消化，含泛素化的赖氨酸的肽段会保留有二甘氨酸标签，利用二甘氨酸（diGG）抗体可特异性地富集肽样品中泛素化修饰肽段，通过对富集后的泛素化肽进行液相色谱-串联质谱检测和数据分析，达到泛素化蛋白组快速非标定量分析之目的。
应用领域
1、不同实验条件下泛素化蛋白质组的定量比较。
2、筛选特定E3泛素连接酶的底物。
技术优点
1、样品经胰酶消化、diGG抗体富集后，可鉴定特异性达90%的泛素化肽。
2、2小时液相色谱-质谱分析可鉴定3000个泛素化修饰位点。
可选仪器
| Q Exactive HF |
|
Q Exactive HF-X |
|
Orbitrap Fusion Tribrid™ |
|
Orbitrap Fusion™ Lumos™ Tribrid™ |
|
ultrafleXtreme MALDI TOF/TOF |
| FAIMS Orbitrap Exploris 480等 |
分析流程
可选数据分析
1、泛素化肽的鉴定及定量。
2、泛素化肽及蛋白的GO分析及差异蛋白GO分析。
3、泛素化肽及蛋白的Pathway通路分析及差异蛋白的Pathway通路分析。
4、重复性分析（仅针对有重复设计的项目）。
5、多样品间表达模式聚类分析（适用于样本数≥3的项目）。
样品要求
| 蛋白提取物：≥5μg |
| 细胞：≥107 |
| 组织：动物组织≥30mg，植物组织：≥500mg |
| 体液：血清≥20μL，脑脊液：≥30μL |
| ★ 注：具体样品需要量根据实验方案有所不同。 |
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